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TC20细胞计数仪在实际应用中应该如何进行操作?

时间:2019-06-10 浏览次数:133

  TC20细胞计数仪采用革新性的血细胞计数室设计,能使细胞呈单层、静止、均一的状态平铺于检测室中,确保了多个视野的光学聚焦的精确性,消除了信号重叠和漂移现象。此外,该技术还为那些检测流动中的细胞某一单一视野、通过移动样品来聚焦成像的仪器提供了解决方案。
 
  TC20细胞计数仪的原理:
  电阻抗检测原理血细胞是相对不良导体,当血细胞悬浮电解质中,将小孔管插入细胞悬液,使其管内充满稀释液,当一个细胞通过小孔时,瞬间引起电压变化出现一个脉冲信号,细胞体积越大,引起脉冲越大,产生脉冲振幅越高。
  流式细胞术加光学检测原理利用流式细胞术使单个细胞随着流体动力聚集的鞘流液在通过激光照射的检测区时,使光束发生折射、衍射和散射,散射光光检测器接受后产生脉冲,脉冲大小与被照细胞的大小成正比,脉冲的数量代表了被照细胞的数量。
 

  TC20细胞计数仪怎么操作:
  1、将计数板及盖玻片擦拭干净,并将盖玻片盖在计数板上。
  2、轻轻吹打细胞悬液,使细胞均匀分布;吸出少许细胞悬液滴在细胞入口,使细胞悬液充满盖玻片和计数板之间,静置1-2min,使细胞沉降;注意盖玻片下不要有气泡,也避免细胞悬液进入旁边的槽中。
  3、在显微镜下对A/B/C/D四个大格内的细胞进行计数,压在大格四周边线上的细胞只计数压在2条边线上的细胞(如右侧和下方);若镜下有2个细胞组成的细胞团,则应按单个细胞计算;若细胞团数量较多,占细胞总量的10%左右,则说明细胞分散不好会导致计算不准确,需要重新制备细胞悬液。
  4、按公式计数细胞数量:细胞数/mL=四个大格内细胞总数×104/4?(每一个大格的体积为长1mm×宽1mm×高0.1mm=0.1mm3,1mL=1000mm3,因此计算时需×104)。
 
  使用TC20细胞计数仪的注意事项:
  1、务必使分散成单个细胞,取样计数前,充分混匀细胞悬液。
  2、显微镜下计数时,遇到2个以上细胞组成的细胞团,应按单个细胞计算。如果细胞团>10%,说明细胞分散不充分。
  3、如果计数时细胞密度较大,数起来较麻烦也不容易计准,所以如果感觉细胞数量较多时,可以从细胞悬液中吸取10至100u1,用少量PBS稀释后再作计数。
  4、注意盖玻片下不要有气泡,也不能让悬液流入旁边槽中。
  5、盖玻片要尽量擦干净,特别是不能带有纤维,否则会造成体积不准。另外四个大格中平均每个大格的细胞数宜在50-150左右,这样总数会比较准确。
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